Analyse biochimique et notions de génie génétique
[BIRC2101]
[37.5h + 45h] 7 crédits
Cette activité se déroule pendant le 1er quadrimestre.
Enseignants : Marc Boutry, François Chaumont, Pierre Morsomme(coord.)
Langue d'enseignement : Français
Niveau : Second cycle
Objectifs (en termes de compétences)
La seconde partie doit permettre à l'étudiant d'acquérir les principes à la base des techniques d'analyse propres à la biochimie et à l'amener à se familiariser avec les techniques courantes d'analyse biochimique.
Objet de l'activité (principaux thèmes à aborder)
La seconde partie exposera les principes à la base des méthodes les plus classiques qui sont utilisées, d'une part, pour purifier les macromolécules biologiques et, d'autre part, pour déterminer leur identité et leurs propriétés biochimiques.
Des exercices pratiques seront organisés pour illustrer les techniques les plus utilisées en génie génétique, les techniques de purification et de caractérisation de protéines ainsi que les méthodes d'identification les plus courantes.
Résumé : Contenu et Méthodes
Régulation de la transcription et de la traduction, modifications post-traductionnelles, adressage de protéines dans les compartiments sub-cellulaires.
Les outils du génie génétique (endonucléases de restriction, enzymes de modification). Vecteurs de clonage : plasmides, phages, chromosomes artificiels. Construction de banques génomiques et d'ADNc. Crible de banques d'ADN (notions). Caractérisation d'un gène : carte de restriction, séquence nucléotidique, profil d'expression. Techniques de clonage dérivées de la PCR (réaction d'amplification en chaîne). Notions d'expression hétérologue.
Partie 2. Analyse biochimique ( 3,5 ECTS)
Centrifugation et fractionnement de cellules, d'organites ou de molécules. Techniques courantes de chromatographie. Electrophorèse de protéines (1D et 2D). Approches microscopiques. Modifications de protéines: spectrométrie de masse et séquençage. Identification immunologique (ELISA, western blot, in situ). Séquençage d'ADN. Tests d'identification et de génotypage basés sur les sondes d'ADN et la PCR: RFLP, RAPD, SNP, microsatellites,
Autres informations (Pré-requis, Evaluation, Support, ...)
Les deux parties peuvent être suivies indépendamment.
Cours supplémentaire : La partie " Notions de génie génétique " peut être approfondie dans le cours de " Génie génétique " (BRMC2101)
Support : notes de cours